Jak vybrat správné zkumavky pro PCR?
Odpověď: Zkumavky BKMAM PCR jsou vhodné pro běžné nástroje PCR a nástroje PCR v reálném čase na trhu (přístroje BD, Beckman a Wanshi PCR).
Srovnání kvantitativní PCR v reálném čase, digitální PCR a tradiční PCR:
Přehled digitální PCR: změřte podíl negativních replikátů, abyste určili absolutní počet kopií.
Přehled PCR v reálném čase: Měření se provádějí v průběhu amplifikace PCR.
Přehled tradiční PCR: změřte množství akumulovaného produktu PCR na konci cyklu PCR.
Je digitální PCR kvantitativní?
Odpověď: Ano, podíl negativních odpovědí RCR odpovídá Poissonovu statistickému algoritmu.
Je PCR v reálném čase kvantitativní?
Odpověď: Ano, protože data se shromažďují během exponenciální (logaritmické) fáze PCR, během níž je množství produktu PCR úměrné množství templátu nukleové kyseliny.
Je tradiční PCR kvantitativní?
Odpověď: Ne, ale porovnáním intenzity zesíleného proužku na gelu se standardem o známé koncentraci můžete získat „semikvantitativní“ výsledek.
Aplikace digitální PCR: absolutní kvantifikace virové zátěže, absolutní kvantifikace standardů nukleových kyselin, absolutní kvantifikace sekvenačních knihoven nové generace, detekce vzácných alel, absolutní kvantifikace genové exprese, obohacení směsi a separace
Aplikace PCR v reálném čase: kvantifikace genové exprese, validace microarray, kontrola kvality a validace testů, detekce patogenů
, genotypizace SNP, variace počtu kopií, analýza mikroRNA, kvantifikace viru, experimenty siRNA/RNAi
Aplikace tradiční PCR: amplifikace DNA, sekvenování, genotypizace, molekulární klonování
Závěr: Výhody digitální PCR: není třeba se spoléhat na reference nebo standardy, požadované přesnosti lze dosáhnout zvýšením celkového počtu replikací PCR, vysoká tolerance k inhibitorům, schopnost analyzovat složité směsi
Na rozdíl od tradiční qPCR reaguje digitální PCR lineárně na počet kopií, které se objeví, a lze detekovat malé rozdíly v násobné změně.
Výhody PCR v reálném čase: zvýšený dynamický rozsah detekce, není nutné zpracování po PCR, detekce schopná pokrýt změny až 2-násobně, získávání dat během exponenciální fáze PCR, zvýšení reportérového fluorescenčního signálu s výsledné amplikony Proporcionální v počtu, štěpící sondy poskytují trvalý záznam štěpení amplikonů
Nevýhody tradiční PCR: špatná přesnost, nízká citlivost, malý dynamický rozsah < 2 logaritmy, nízké rozlišení, neautomatizace, pouze diferenciální analýza založená na specifikacích, výsledky nejsou uvedeny jako čísla, nedostatečná kvantifikace pomocí barvení ethidium bromidem, Post-PCR
Pro více informací o zkumavkách s PCR stripem nás kdykoli kontaktujte:
Michael Peng
Changde BKMAM Biotechnology Co., Ltd
Adresa: Budova 1, East Of New Material Industrial Zone,
Linli zóna ekonomického rozvoje, Changde, 415200 Hunan
Tel: plus 86-17363688083
Mob: plus 8613450479355(whatsapp&wechat)
Skype:peng.michael2011
https://hnbikeman.en.alibaba.com
Email:michael@bkmbio.com
Jednorázový dodavatel spotřebního materiálu pro laboratoře!
Hledáme upřímné agenty po celém světě a upřímně se těšíme na spolupráci s vámi.
